Natural Killer Cells: Methods and Protocols

این جلد شامل مجموعه‌ای از روش‌شناسی سلول‌های کشنده طبیعی مربوط به تحقیقات پایه و ترجمه است. این روش‌ها پیشرفت‌های جدیدی را در زمینه سلول‌های کشنده طبیعی (NK) ارائه می‌کنند، مانند درک تأثیر متابولیسم سلول‌های NK بر عملکرد آن، شناسایی پیچیدگی زیرمجموعه‌های سلول NK از طریق سیتومتری جرمی، و تعیین ظهور سلول‌های NK حافظه در مدل موش. عفونت MCMV روش‌هایی که مهاجرت سلول‌های NK و سمیت سلولی را از طریق تجزیه و تحلیل نقطه پایانی یا تصویربرداری تک سلولی زنده مطالعه می‌کنند نیز مورد بحث قرار می‌گیرند. فصل‌ها همچنین روش‌های مربوط به کاربرد ترجمه‌ای سلول‌های NK، مانند گسترش ex vivo سلول‌های NK بر روی رده‌های سلولی K562 اصلاح‌شده ژنتیکی برای بیان IL-15 متصل به غشاء یا IL-21 متصل به غشاء، در مقیاس بزرگ را شرح می‌دهند. کشت سلول NK، تکنیک‌های کنونی برای مهندسی سلول‌های NK برای بیان گیرنده‌های آنتی ژن کایمریک یا گیرنده‌های کموکاین با استفاده از ناقل‌های رتروویروسی، الکتروپوراسیون mRNA، و پدیده طبیعی تروگوسیتوز. این فصل‌ها که با فرمت بسیار موفق «روش‌ها در زیست‌شناسی مولکولی» نوشته شده‌اند، شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های آزمایشگاهی گام به گام با قابلیت تکرار آسان، و نکاتی در مورد عیب‌یابی است. و اجتناب از دام های شناخته شده.

بهترین و کامل، سلول های کشنده طبیعی: روش ها و پروتکل ها منبع ارزشمندی برای محققانی است که نه تنها می خواهند مکانیسم های حاکم بر NK را درک کنند. رفتار و تنوع سلولی، بلکه برای کسانی که می خواهند بدانند چگونه به طور سیستماتیک سلول های NK را برای کاربردهای ایمونوتراپی پذیرفته ارزیابی کنند.

This volume contains collection of Natural Killer Cell methodologies relevant for both basic and translational research. These methodologies present new developments in the natural killer (NK) cell field, such as understanding the influence of NK cells metabolism on its function, identifying complexity of NK cell subsets through mass cytometry, and determining the emergence of memory NK cells in murine model of MCMV infection. Methods that study NK cell migration and cytotoxicity through endpoint analysis or live single cell imaging are also discussed. Chapters also describe methods pertaining to translational application of NK cells, such as ex vivo expansion of NK cells on K562 cell lines genetically modified to express either membrane bound IL-15 or membrane bound IL-21, large scale NK cell culture, current techniques for engineering NK cells to express chimeric antigen receptors or chemokine receptors using retroviral vectors, electroporation of mRNA, and the natural phenomenon of trogocytosis. Written in the highly successful Methods in Molecular Biology series format, these chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step readily reproducible laboratory protocols, and tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls.

Cutting edge and thorough, Natural Killer Cells: Methods and Protocols is a valuable resource for researchers who not only want to understand mechanisms that govern NK cell behavior and diversity, but also for those who want to understand how to systematically evaluate NK cells for adoptive immunotherapy applications.